代谢组研究服务 - 定制化高通量靶向代谢组
高通量靶向代谢组灵活定制:博淼基于六种靶向Panel技术方法,结合不同项目研究背景需求灵活调整,从而组合成不同的高通量靶向代谢组,达到最佳的检测性价比。
围绕我们开发了相应的靶向定量方法群,它们利用了目前生物定量分析领域中公认的金标准方法——液相色谱串联质谱选择反应检测扫描(SRM scan by LC-MS/MS)+稳定同位素标记内标(Stable Isotope-labeled internal standard)。通过对代谢物与脂质的理化性质、浓度范围以及不同LC-MS/MS方法的适用性等分析化学因素的分析,客户可以根据6种不同的LC-MS/MS方法进行组合,同一样本多次提取,多次测量,从而能够适合不同课题研究假说的代谢物进行绝对定量检测。
串联质谱技术原理
串联质谱(Tandem Mass Spectrometry, 简称MS/MS)与高分辨率准确质谱(High Resolution and Accurate Mass Spectrometry, 简称HRMS)是代谢组学(也包括脂质组学)研究中应用最广泛、最主要的两种质谱技术,它们分别适用于靶向代谢分析(Targeted Metabolites Analysis)和非靶向代谢组学分析(Untargeted Metabolomics)这两种主流的代谢组学分析策略。
目前,串联质谱最为常见的仪器构造形式是串联三重四极杆(Triple quadrupole)。如下面示意图所示,实施检测时生物样本先在液相色谱(Liquid Chromatography, 简称LC)或气相色谱(Gas Chromatography, 简称GC)的色谱柱里进行分离(Separation),然后待测组分进入质谱并得到电离(Ionization),电离后的待测化合物的母离子先经过第一级四极杆质量分析器(Quadrupole mass analyzer)的隔离与筛选;再进入第二级四极杆,此区域被称作碰撞池,其中充满一定压强的惰性气体做碰撞气(例如,氮气或氩气等),待测化合物母离子进入碰撞池后在直流电场的驱动下加速,并与碰撞气撞击,碰撞动能转化的化学内能诱导化合物在键能脆弱的结构区发生解离,从而产生与待测化合物的化学结构相关的一系列二级质谱碎片离子(此过程称为碰撞诱导解离Collision Induced Disassociation,简称CID);随后,碎片离子进入第三级四极杆质量分析器再次进行隔离与筛选,从而使预先设定好的某一特定碎片离子可以到达检测器,产生的微电流经过级联放大和信号处理后,转变成质谱仪响应的强度值(Intensity或Abundance)而记录、存储下来。这一检测过程在质谱学上被定义为选择反应监测模式(Selected Reaction Monitoring, 简称SRM),【母离子→子离子】被称作质谱扫描的离子对(SRM transition)。经过双重质量过滤,SRM扫描能够极大地降低生物基质产生的化学检测噪音并显著提高检测信噪比,所以SRM扫描具有灵敏度高、特异性好、直接测量分子结构本身、适合多目标物同时靶向检测等先天优势,是目前生物样本痕量分析检测中最为常用的一种定量技术,常被成为生物样本定量分析的“金标准”方法,在食品安全、环境分析、药物研发、临床检测等领域发挥着广泛的作用。
串联质谱选择反应监测扫描工作示意图