16S/18S全长扩增子测序
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技术原理
TECHNICAL PRINCIPLE
PanBio系统采用的为单分子实时测序系统(SMRT),应用了边合成边测序的原理,以SMRT芯片为测序载体。基本原理为:聚合酶捕获文库DNA序列,锚定在零模波导孔底部;4种不同荧光标记的dNTP随机进入零模波导孔底部;荧光dNTP被激光照射,发出荧光,检测荧光;荧光dNTP与DNA模板的碱基匹配,在酶的作用下合成一个碱基;统计荧光信号存在时间长短,区分匹配碱基与游离碱基,获得DNA序列;酶反应过程中,一方面使链延伸,另一方面使dNTP上的荧光基因脱落;聚合反应持续进行,测序同时持续进行。