4006-506-908

iTRAQ/TMT标记蛋白组研究

技术原理

TECHNICAL PRINCIPLE

iTRAQ试剂由报告基团、中性平衡基团和反应基团三部分组成。报告基团及其相对应的平衡基团的质量和相同,而反应基团能与赖氨酸ε氨基和所有肽链的氨基末端连接,可标记所有氨基酸。不同标记试剂与来源不同样本的肽段结合,经过色谱分离,并通过一级和二级质谱,平衡基团在二级质谱发生中性丢失,而报告基团在二级质谱低质量区域产生多个报告离子,其信号强度分别代表该标记样品的表达量,根据报告离子的面积计算同一蛋白或肽段在不同样本的比值,从而实现相对定量。TMT标签由三部分组成:分子量报告子、分子量标准化部分和反应基团,形成2种、6种、10种或16种相对分子质量均等量的异位标签。

    技术优势

    TECHNOLOGICAL SUPERIORITY

    通量灵活

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    4标、8标、10标及16标,可根据样本组数有多种选择;

    重复性好

    2 / 6

    同一批次完成定性及定量,大大增强重复性,可以给出每一个可检测到的蛋白在组间的ratio值;

    准确定量

    3 / 6

    利用磁碰撞诱导解离后进行二级质谱分析时,带不同同位素标记的肽段同时被检测到,根据峰面积对比差异,定量更为准确。

    鉴定结果真实

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    二级质谱产生高质量的B\Y离子,蛋白序列匹配率提高,鉴定结果真实可靠。同时,一个蛋白由多个肽段匹配达到置信度,进一步提高结果质量的可靠性。

    检测的蛋白范围广

    5 / 6

    以往2D电泳实验无法检测的蛋白,包括样本量精少的,疏水性蛋白,以及PH3-10以外的蛋白都可以进行检测

    服务流程

    SERVICE PROCESS

    • 蛋白样本提供

    • 样本及实验预判

    • 酶解

    • 肽段标记、定量混合机SCX分级

    • 质谱分析

    • 软件分析

    样本要求

    SAMPLE REQUIREMENTS